Патриарх Никон освятил Темничный придел в честь Успения Пресвятой Богородицы. Знаменательно, что именно здесь совершалось отпевание Первосвятителя. Придел состоит из церкви и трапезы, в южной части которой помещается Темница Господня. Это небольшая часовня, где хранятся Узы Христовы — священные подобия камня-колодки с двумя отверстиями, в которые были заключены ноги Спасителя. Святыня воспроизводит первообраз, перенесенный в храм Гроба Господня из претории Понтия Пилата. Успенская церковь отделена от трапезы стеной с тремя арочными проемами. Подобно прототипу, она имеет четыре опорных столпа. К восточным примыкает великолепный трехъярусный пятипролетный изразцовый иконостас с надписью по фризу: «Церков Темница, в ней же удержан бысть Господь наш Иисус Христос от Пилата, дондеже приготовлены бысть вещи о Распятии. Прежде вертеп был стража вертограду». В Иерусалиме столпы Темничной церкви низкие и свод над ними сомкнутый. В Успенском же приделе столпы высокие, предназначенные нести световую главу, к сожалению, разобранную в XVIII веке. Пещерного типа церковьпервообраз была преображена в Новом Иерусалиме в стройный одноглавый храм, пронизанный льющимся свер ху светом, который символизирует свет небесный, горний. Этот архитектурный образ воплощает тему победы над смертью, торжества жизни вечной. В память о страданиях Пресвятой Богородицы, видевшей Своего Сына на Кресте, в северо-западной части Успенской церкви устроена Патриархом Никоном внутристенная часовня.
Переосвящен в 1761, 16 декабря 1999 года Святейшим Патриархом Московским и всея Руси Алексием II, 8 мая 2016 года Святейшим Патриархом Московским и всея Руси Кириллом.